تنقية وخصائص انزيم البروتييز من بكترياBacillus licheniformis B1

الملخص

نقي الانزيم بخطوتين تضمنت الترسيب بكبريتات الامونيوم بنسبة تشبع 70% ثم كروموتوغرافيا التبادل الايوني بأستخدام عمود DEAE-Sephadex ,وكانت الفعالية النوعية للانزيم المنقى (U/ml.86.6) و بعدد مرات تنقية 2.72 وبحصيلة انزيمية مقدارها 45%. تمت دراسة توصيف الانزيم المنقى, وأظهرت النتائج بان افضل فعالية انزيمية وثباتية كانت عند الرقم الهيدروجيني 9 (86U/ml.), واظهرت اقصى فعالية للانزيم عند درجة حرارة 50.م° (88U/ml.) واحتفظ الانزيم بـ(87%) من فعاليته عند نفس درجة الحرارة لمدة 30 دقيقـــة. درس تأثير بعض الايونات الفلزية والمواد المختزلة والكلابية على فعالية الانزيم المنقى, ولوحظ زيادة في في فعالية الانزيم بحدود 110% عند حضنه مع ايون Mn2+ بتركيز 10 ملي مولار بينما كانت الفعالية المتبقية للانزيم عند حضنه مع نفس التركيز من ايوني Ca2+ و Mg2+هي 95% و 92% على التوالي, كما لوحظ تأثير قليل لمادة PMSF بتركيز 10 ملي مولار في حين انخفضت النسبة المؤية للفعالية الى 18% عند معاملة الانزيم بمادة EDTA بتركيز 10ملي مولار.